સિટુ હાઇબ્રીડાઇઝેશનમાં ફ્લોરોસન્સ

ફ્લોરોસેન્સ ઇન સિટુ હાઇબ્રિડાઇઝેશન (FISH) એ ડીએનએ (ડીએનએ) ની શોધ માટે આનુવંશિક તપાસ પદ્ધતિ છેdeoxyribonucleic એસિડ) વ્યક્તિગત કોષોના મધ્યવર્તી કેન્દ્રમાં.

આ પદ્ધતિમાં વિશિષ્ટ ડીએનએ પ્રોબનો ઉપયોગ શામેલ છે જે ફક્ત જીનોમિક પ્રદેશો વિશે જ માહિતી પ્રદાન કરી શકે છે કે જેના માટે ઉપયોગમાં લેવાતી ચકાસણી વિશિષ્ટ છે.

સંકેતો (એપ્લિકેશનના ક્ષેત્રો)

  • સંખ્યાત્મક રંગસૂત્ર વિકૃતિની શંકા:
    • સંખ્યાત્મક રંગસૂત્ર અસાધારણતાની શોધ (દા.ત., ટ્રાઇસોમી 21).
    • રંગસૂત્રીય વિકૃતિઓ માટે મોઝેઇકના જથ્થા માટે (દા.ત., ઉલ્રિચ-માંટર્નર સિન્ડ્રોમ).
  • માઈક્રોડેલીશન માટે શોધ (દા.ત., મોનોસોમી 22q11.2).
  • રંગસૂત્રીય વિકૃતિઓની તપાસ (દા.ત., ક્રોનિક લિમ્ફોસાઇટિક લ્યુકેમિયા (સીએલએલ), નોન-હોજકિન લિમ્ફોમા).

ઉપરોક્ત સંકેતોનું ઇન્ટરફેસ FISH દ્વારા વિશ્લેષણ કરવામાં આવે છે (વિગતો માટે "ધ લેબોરેટરી પ્રોસિજર" જુઓ).

પ્રક્રિયા

સામગ્રી જરૂરી છે

  • હેપરિન લોહી (ઓછામાં ઓછું 1-2 મિલી)

દર્દીની તૈયારી

  • જરૂરી નથી

વિક્ષેપકારક પરિબળો

  • કંઈ જાણીતું નથી

પ્રયોગશાળા પદ્ધતિ

ફ્લોરોસેન્સ ઇન સિટુ હાઇબ્રિડાઇઝેશન (FISH) માં ફ્લોરોસેન્ટલી લેબલવાળી ડીએનએ પ્રોબ્સ (FISH પ્રોબ્સ) નો ઉપયોગ શામેલ છે. આ રંગસૂત્ર પરની ચોક્કસ ડીએનએ સાઇટ સાથે જોડાઈ શકે છે, જેને વર્ણસંકરીકરણ કહેવાય છે. ફ્લોરોસન્ટલી લેબલવાળી ચકાસણીને બાંધ્યા પછી અથવા પછી, મૂલ્યાંકન માઇક્રોસ્કોપનો ઉપયોગ કરીને કરી શકાય છે. આ પ્રક્રિયામાં, ઇન્ટરફેસ ન્યુક્લીની અંદર ફ્લોરોસેન્સ સિગ્નલોની સંખ્યા નક્કી કરવામાં આવે છે. વધુમાં, મેટાફેઝ પર સ્થાનનું મૂલ્યાંકન (દા.ત. સ્થાનાંતરણ/સ્થાનનું સ્થાનાંતરણ/બીજા રંગસૂત્રમાં) રંગસૂત્રો શક્ય છે.

જ્યારે વિવિધ ફ્લોરોસન્ટ રંગો FISH પ્રક્રિયામાં વિવિધ લક્ષ્ય ડીએનએ માટે વપરાય છે, તેને મલ્ટીકલર ફિશ તરીકે ઓળખવામાં આવે છે. આ જીનોમના સંપૂર્ણ વિઝ્યુલાઇઝેશનને મંજૂરી આપે છે.

કેટલાક કિસ્સાઓમાં, ડીએનએ તપાસને ફ્લોરોસન્ટ ડાઇ સાથે સીધું લેબલ કરવામાં આવતું નથી, જેને પરોક્ષ પ્રક્રિયા કહેવામાં આવે છે. તેના બદલે, તે જેમ કે પદાર્થો સાથે લેબલ થયેલ છે Biotin અથવા ડિગોક્સિજેનિન. આ પદ્ધતિ વધુ જટિલ માનવામાં આવે છે પરંતુ વધુ સંવેદનશીલ છે.